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CAR-T細(xì)胞培養(yǎng)基N109-1000
專門為體外培養(yǎng)和擴(kuò)增外周血來(lái)源或經(jīng)純化分離得來(lái)的人T細(xì)胞而研發(fā)，適用于人 CAR-T細(xì)胞的體外培養(yǎng)和擴(kuò)增。本產(chǎn)品為無(wú)異源性組份培養(yǎng)基，無(wú)動(dòng)物源性成份、不含異源蛋白，僅含有微量的重組轉(zhuǎn)鐵蛋白和少量人白蛋白(<0.15%）。其中，人白蛋白成份已參考FDA指南進(jìn)行包括 HIV1/HIV2、HBV、HCV 和 Syphilis 等的檢測(cè)，結(jié)果均為陰性。
CAR-T細(xì)胞培養(yǎng)基N109-1000
該培養(yǎng)基專門為體外培養(yǎng)和擴(kuò)增外周血來(lái)源或經(jīng)純化分離得來(lái)的人T細(xì)胞而研發(fā)，適用于人 CAR-T細(xì)胞的體外培養(yǎng)和擴(kuò)增。
特點(diǎn)：本品為即用型培養(yǎng)基，在實(shí)際使用過(guò)程中可根據(jù)需要自行添加生長(zhǎng)因子或抗體等。
儲(chǔ)存方法：2-8℃，避光保存。
應(yīng)用：用于從人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)或純化分離T細(xì)胞制備CAR-T 細(xì)胞的培養(yǎng)或擴(kuò)增。
使用說(shuō)明:
從外周血PBMC擴(kuò)增活化CAR-T細(xì)胞:
Day 1-3
1.將新鮮分離或凍存復(fù)蘇的人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)，按照2X106cells/mL的濃度，懸于Nobimpex N108或N109培養(yǎng)基中。按1ml/孔將細(xì)胞添加到24孔板中。
2.將Human T-Activator CD3/CD28磁珠以與細(xì)胞1:1的比例(約12.5-18.75μl beads)添加到細(xì)胞中。
3.添加終濃度300μL/mL的IL-2。將細(xì)胞放置于37℃、5%CO細(xì)胞培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
Day 4-5
4.重調(diào)整細(xì)胞濃度至0.5-1.0X106cells/mL，加入CAR轉(zhuǎn)染病毒(MOI:1-5)，混勻，繼續(xù)培養(yǎng)。
Day6-8
5.收集細(xì)胞進(jìn)行分析或后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
6.如需進(jìn)一步擴(kuò)大活化的T細(xì)胞數(shù)量，可以繼續(xù)用Human T-Activator CD3/CD28磁珠和重組人IL-2重新活化細(xì)胞。重復(fù)步驟1-4。
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